Bakteriyel endotoksin testi, özellikle medikal ürünlerin ve cihazların güvenliğini değerlendirmede kritik bir rol oynamaktadır. Bu test, Gram-negatif bakterilerin dış zarlarında bulunan ve insanlarda ateşe neden olabilecek lipopolisakkaritleri (LPS) veya endotoksinleri tespit etmek için kullanılır. Enjekte edilebilir ilaçlar, implantlar, diyaliz solüsyonları ve bazı medikal cihazlar gibi ürünlerde endotoksin varlığı potansiyel olarak tehlikelidir.

Bakteriyel endotoksin testi için en yaygın olarak kullanılan yöntem, LAL (Limulus Amebosit Lizat) testidir. Bu test, Limulus polyphemus adlı at nalı yengecinin (Horseshoe Crab) kanındaki amebositlerden elde edilen bir enzimi kullanmaktadır. LAL, endotoksin varlığında pıhtılaşma tepkimesi gösterir.

LAL testi, üç ana formatta gerçekleştirilebilir:

1. **Jel Pıhtılaşma Yöntemi**: Bu, en basit LAL testi yöntemidir. Örnek ve LAL reaktifinin karıştırılmasının ardından, endotoksin varlığında bir jel pıhtılaşması oluşur. Eğer jel oluşumu gözleniyorsa, bu endotoksinin var olduğunu gösterir.

2. **Türbidimetrik (Bulutlanma) Yöntemi**: Bu yöntem, endotoksinin varlığında oluşan pıhtılaşmanın bulanıklık seviyesine dayanarak çalışır. Özel bir spektrofotometre, pıhtılaşmanın başladığı zamanı ve hızını tespit eder.

3. **Kromojenik (Renkli) Yöntemi**: Bu yöntem, endotoksinin varlığında bir renk değişikliği oluşturan substratlar kullanarak çalışır. Özel bir spektrofotometre, renk değişikliğini ölçer.

Bazı avantaj ve dezavantajlar:

- **Jel Pıhtılaşma Yöntemi**: Avantajları arasında basitlik ve hız bulunmaktadır. Ancak, bu yöntem kantitatif sonuçlar sağlamaz ve sadece belirli bir eşik değerinin üzerinde endotoksin varlığını tespit eder.
  
- **Türbidimetrik ve Kromojenik Yöntemler**: Bu yöntemler, kantitatif sonuçlar sağlarlar, bu nedenle belirli bir endotoksin konsantrasyonunu belirleme yeteneğine sahiptirler.

Testin uygulandığı örnek türüne ve örneğin içeriğine bağlı olarak, yanıltıcı pozitif veya yanıltıcı negatif sonuçlar alınabilir. Bu nedenle, LAL testi yapmadan önce uygun örnek hazırlığı ve seyreltmeler önemlidir.

Ayrıca, at nalı yengeci popülasyonunun korunması gerektiği için, sentetik alternatiflerin (örn. rekombinant faktör C (rFC) bazlı testler) geliştirilmesi ve kullanımı üzerinde çalışmalar devam etmektedir. Bu alternatifler, özellikle sürdürülebilirlik ve etik konularını göz önünde bulundurarak, geleneksel LAL testine bir alternatif olarak kabul edilmektedir.