AMES Test (OECD 471)
Biocompatibility Analyses

AMES Test (OECD 471)

    AMES Testi – OECD 471

    AMES Testi Nedir?
    AMES testi, kimyasal maddelerin genetik materyal üzerinde mutasyonlara yol açma potansiyelini değerlendiren bir genotoksisite testidir. OECD 471 rehberi, AMES testinin uluslararası standartlara uygun şekilde nasıl gerçekleştirileceğini tanımlar. Test, kimyasalların DNA üzerinde zararlı etkileri olup olmadığını belirlemek için bakteri hücreleri kullanır ve kimyasalların kanserojen olma potansiyelini erken aşamada değerlendirmek için yaygın olarak kullanılır.


    OECD 471: AMES Testinin Amacı

    1. Mutajenik Potansiyeli Değerlendirmek:

      • Kimyasal maddelerin genetik materyalde kalıcı değişikliklere neden olma olasılığını belirlemek.
    2. Kimyasal Güvenliğini Sağlamak:

      • Kimyasal, farmasötik, kozmetik ve endüstriyel ürünlerin genotoksisite riski açısından değerlendirilmesi.
    3. Kanserojenite Potansiyelini Belirlemek:

      • Mutajenik maddeler genellikle kanserojen olma eğilimindedir. Bu nedenle, AMES testi kanserojenite riskinin ön değerlendirilmesinde önemli bir araçtır.
    4. Regülasyonlara Uyum Sağlamak:

      • OECD ve diğer uluslararası standartlara uygunluk.

    AMES Test Süreci

    1. Testte Kullanılan Organizmalar (Bakteri Türleri)

    AMES testi genellikle Salmonella typhimurium ve Escherichia coli bakterilerinin genetik olarak modifiye edilmiş suşları kullanılarak gerçekleştirilir. Bu suşlar, spesifik genetik mutasyonlara duyarlıdır ve test edilen maddenin mutasyon oluşturma potansiyelini gösterebilir.

    2. Test Yöntemi

    a. Numune Hazırlığı ve Test Maddesinin Uygulanması

    • Test edilen kimyasal maddeler farklı dozlarda hazırlanır.
    • Maddeler, bakteriyel kültürlere uygulanır.

    b. S9 Metabolik Aktivasyon Sistemi

    • Bazı kimyasallar metabolize olmadan mutajenik özellik göstermez. Bu nedenle, S9 karışımı (memeli karaciğer enzimleri) kullanılarak metabolik aktivasyon sağlanır.
    • Hem S9 aktivasyonu ile hem de S9 olmadan test yapılır.

    c. Ters Mutasyon Testi (Reverse Mutation Assay)

    • Test edilen madde mutajenikse, bakteriler genetik mutasyon geçirir ve belirli besin maddelerinden bağımsız olarak çoğalabilir hale gelir.

    d. Plaka Kültürleri

    • Test maddesi ve bakteriler agar plakalarına eklenir.
    • Mutasyon geçiren bakteriler koloni oluşturur ve bu koloniler sayılarak mutasyon oranı belirlenir.

    3. Kontrol Grupları

    • Pozitif Kontrol: Bilinen mutajenik bir madde kullanılarak testin doğruluğu sağlanır.
    • Negatif Kontrol: Kimyasal uygulanmayan bakterilerle mutasyon oranı karşılaştırılır.

    Değerlendirme Kriterleri

    1. Koloni Sayısı:

      • Test edilen maddeden kaynaklanan mutasyonların derecesi, plakalar üzerinde oluşan koloni sayısıyla ölçülür.
      • Mutajenik bir madde, pozitif kontrol grubundan belirgin şekilde daha fazla koloni oluşturur.
    2. Doz-Cevap İlişkisi:

      • Kimyasalın dozu arttıkça mutasyon oranının da artıp artmadığı analiz edilir.
    3. S9 Aktivasyonu ile Değişim:

      • S9 enzimleri ile yapılan testlerde mutasyon oranındaki değişiklik incelenir.

    AMES Testinin Uygulama Alanları

    1. Kozmetik Ürünler:

      • Yeni kozmetik içeriklerin genotoksisite riski değerlendirilir.
    2. Farmasötik Ürünler:

      • İlaç geliştirme sürecinde aktif bileşenlerin genotoksisite potansiyeli.
    3. Endüstriyel Kimyasallar:

      • Çevreye veya insan sağlığına temas eden kimyasalların güvenlik değerlendirmesi.
    4. Gıda Katkı Maddeleri ve Boyalar:

      • Gıda ile temas eden kimyasalların güvenliği analiz edilir.

    OECD 471 ve Yasal Düzenlemeler

    1. OECD 471:

      • AMES testinin uygulanması ve raporlanması için uluslararası rehberdir.
    2. REACH Düzenlemeleri:

      • Avrupa Birliği’nde kimyasal güvenliği için genotoksisite testleri gereklidir.
    3. FDA:

      • İlaç ve biyolojik ürünlerde genotoksisite testleri zorunludur.
    4. EC 1223/2009 Kozmetik Tüzüğü:

      • Kozmetik ürünlerde kullanılan kimyasalların güvenlik değerlendirmesi için genotoksisite testleri şarttır.

    AMES Testinin Avantajları

    1. Hızlı ve Uygun Maliyetli:

      • Genotoksisite analizi için hızlı ve ekonomik bir yöntemdir.
    2. Duyarlılık:

      • Mutajenik potansiyeli yüksek doğrulukla belirleyebilir.
    3. Kapsamlı Uygulama:

      • Farklı kimyasal sınıfların değerlendirilmesi için uygundur.
    4. Regülasyonlara Uyum:

      • Uluslararası güvenlik standartlarına uygunluğu sağlar.

    AMES testi, kimyasalların genetik materyale zarar verme potansiyelini değerlendirmek için kritik bir araçtır. OECD 471 rehberi doğrultusunda gerçekleştirilen bu testler, kimyasal güvenliğinin erken aşamada değerlendirilmesine olanak tanır ve ürünlerin uluslararası düzenlemelere uygunluğunu sağlar.